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甜菜堿是一種生物堿，它的結(jié)構(gòu)和氨基酸類似，屬于季銨堿類物質(zhì)。它廣泛存在于動植物體內(nèi)，比如植物的枸杞、甜菜、豆科植物等都含有甜菜堿，動物的章魚、蝦等也含有甜菜堿。甜菜堿一般是從天然植物的根莖葉和果實中提取出來的，屬于重要的次生代謝產(chǎn)物，它能夠增強植物的抗逆性，比如抗鹽堿，耐旱等。另外，它也被廣泛的應(yīng)用在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)、食品科學(xué)等領(lǐng)域。為了檢測植物中甜菜堿的含量，通常情況下要看具體的需求。那么，常見的方法有滴定法、分光光度法、高效液相色譜（HPLC）法等。

1.滴定法

為了準(zhǔn)確的測定甜菜堿的含量，就要對樣品進行干燥處理，在105℃的烘干到恒重，稱取干燥的樣品0.4g，加入冰醋酸50mL，加熱到溶解的。加入25mL的乙酸汞溶液，冷卻至室溫。加入結(jié)晶紫指示劑2滴就夠了，這個時候就可以用高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定了。高氯酸標(biāo)準(zhǔn)溶液一般用0.1mol/L，這個濃度不能太高，防止滴定終點不準(zhǔn)確。在滴定的過程中，如果發(fā)現(xiàn)溶液突然變成綠色了，那就是到滴定終點，剛剛好反應(yīng)完全了。根據(jù)消耗的情況，計算出樣品中含有甜菜堿的含量，需要將滴定結(jié)果用空白試驗來校正。

2.分光光度法

檢測甜菜堿含量，用分光光度法相對比較簡單。首先，將樣品溶解到溶劑中，也就是進行適當(dāng)?shù)南♂?。接著，選擇適當(dāng)?shù)臋z測波長，利用分光光度計測定樣品的吸光度值。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算出樣品中甜菜堿的含量。此外，還可以利用比色的方法完成檢測。也就是在pH=1.0的條件下，甜菜堿鹽酸鹽能夠和雷氏鹽生成紅色沉淀，通過離心，去除上清液留下沉淀。讓沉淀溶解在70%的丙酮中并呈粉紅色溶液，在525nm處利用分光光度計測定吸光度值，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算出樣品的甜菜堿含量。

3.高效液相色譜（HPLC）法

含有甜菜堿的植物樣品經(jīng)過甲醇溶液的提取，用混合型陽離子交換固相萃取柱凈化，再用乙腈定容，最用在205nm波長的紫外檢測器讀取數(shù)據(jù)，記錄色譜峰的保留時間，峰高和峰面積，使用外標(biāo)法定量測定結(jié)果。

檢測條件

色譜柱親水作用多孔硅膠色譜柱150 mmXh.6mm,5 um。流動相：乙腈——水，梯度洗脫。流速1.0 mL/ min。柱溫30℃，波長205 nm，進樣量10.0uL。

標(biāo)準(zhǔn)曲線制作

用乙腈溶液將甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)貯備液溶液逐級稀釋7個點，作為標(biāo)準(zhǔn)工作液依次由低到高進樣。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為橫坐標(biāo)，以對應(yīng)的峰面積為縱坐標(biāo)，進行線性回歸，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。

樣品檢測

取標(biāo)準(zhǔn)工作溶液和樣品定容液進樣測定，以色譜峰保留時間定性，以標(biāo)樣色譜峰峰面積和樣品溶液峰峰面積比較定量。同時做空白實驗。