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所謂游離棉酚，就是棉仁組織中呈現(xiàn)游離狀態(tài)的棉酚。棉酚是一種多酚類化合物，存在于錦葵科植物的根、莖和種子等。要說的是，它是有毒的。因為棉花自己也要防病蟲害啊，那些不能自己防病蟲害的棉花，逐漸就被害蟲吃完了，剩下來的都是優(yōu)良的品種，自身體內(nèi)有能夠抵抗病蟲害的物質(zhì)，也就是游離棉酚。棉酚是從棉籽中分離出來的色素物質(zhì)，是倍半萜多酚物質(zhì)，具有半縮醛、羥基醛和烯醇三種異構(gòu)體。棉仁中的棉酚有兩種，一種是結(jié)合態(tài)的棉酚，一種是游離態(tài)棉酚。游離棉酚對人和畜生都有毒，要小心的。

檢測棉花中的游離棉酚含量，方法還是挺多的。比如常見的分光光度法，更高準(zhǔn)確度的高效液相色譜（HPLC）法。如需更高靈敏度、更高分辨率的檢測，可以通過薄層色譜法、高效毛細(xì)管電泳法、液質(zhì)聯(lián)用法等。

1.分光光度法

國標(biāo)法的檢測原理：將70%的丙酮作為提取溶劑，游離棉酚在378nm處有最大吸收，測定不同濃度棉酚標(biāo)準(zhǔn)品的吸光值并繪制出標(biāo)準(zhǔn)曲線，同時測定樣品的吸光值并與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較而定量。雖然這種方法操作簡便，但是準(zhǔn)確性較差?；桨贩z測的原理：采用異丙醇與正己烷的混合溶劑對游離棉酚進(jìn)行提取，并與苯胺反應(yīng)將棉酚轉(zhuǎn)化為苯胺棉酚，于最大吸收波長440nm處測定吸光值。

2.高效液相色譜（HPLC）法

HPLC是一種比較靈敏而且準(zhǔn)確的檢測方法，方法雖然是這個方法，實際操作起來卻是不同的。不同種類的樣品，檢測方法也是有所不同的。比如植物食品、動物體內(nèi)、棉花、血清等，如果只采用一種方法去測各種樣品，可能會出現(xiàn)結(jié)果的偏差。因此，在進(jìn)行檢測之前，需要對樣品進(jìn)行充分的了解，選擇最佳的方法。比如棉花中，將棉酚的醛基與手性氨基化合物進(jìn)行縮合，其產(chǎn)物的理化性質(zhì)，尤其是色譜行為差異較大，再用高效液相色譜儀進(jìn)行分離和檢測。使用L-苯基丙氨醇與游離棉酚發(fā)生衍生化反應(yīng)，分別生成(-)-棉酚-L-苯基丙氨醇和(+)-棉酚-L-苯基丙氨醇，以甲醇:水:磷酸=85：15：0.1為流動相，在C18柱上兩者有不同的保留時間，從而達(dá)到分離，檢測波長為254nm。

3.液質(zhì)聯(lián)用（LC-MS）法

對于生物制品，比如血液樣品中的游離棉酚檢測，這個是代謝產(chǎn)物，含量相對比較小，需要采用更高靈敏度的LC-MS檢測。血漿樣品中游離棉酚用乙醚進(jìn)行提取，流動相為乙腈：30mmol/L醋酸銨=85:15，負(fù)離子模式，選擇性離子監(jiān)測，棉酚的檢測離子為517.2，內(nèi)標(biāo)物甘草次酸的檢測離子為469.3，氮氣流速7L/min，霧化室壓力40psig，氮氣溫度350℃，毛細(xì)管電壓4000V，結(jié)果棉酚的保留時間3.6min，甘草次酸的保留時間3.1min，準(zhǔn)確度和精密度符合要求，可用來測定生物樣品中游離棉酚含量。