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茶氨酸含量檢測方法
來源: | 作者:上海優(yōu)選生物 | 發(fā)布時間: 2025-04-24 | 182 次瀏覽 | 分享到:
在制備茶葉的時候,我們會發(fā)現(xiàn)一種特有的氨基酸,它是游離狀態(tài)的,且呈L型的茶氨酸。它的化學式是C7H14N2O3,分子量為174.2,易溶于水,具有焦糖香味和味精的鮮爽。遇到強酸的時候,茶氨酸會被水解為L-谷氨酸和乙胺,茚三酮反應呈紫色。茶氨酸有很多的藥理功能,比如鎮(zhèn)靜,減肥,降血脂,抗疲勞,抗衰老,增強記憶,提高免疫力等。茶氨酸約占茶葉氨基酸總量50%~60%,化學名稱為N-乙基-L-谷氨酰胺。

在制備茶葉的時候,我們會發(fā)現(xiàn)一種特有的氨基酸,它是游離狀態(tài)的,且呈L型的茶氨酸。它的化學式是C7H14N2O3,分子量為174.2,易溶于水,具有焦糖香味和味精的鮮爽。遇到強酸的時候,茶氨酸會被水解為L-谷氨酸和乙胺,茚三酮反應呈紫色。茶氨酸有很多的藥理功能,比如鎮(zhèn)靜,減肥,降血脂,抗疲勞,抗衰老,增強記憶,提高免疫力等。茶氨酸約占茶葉氨基酸總量50%~60%,化學名稱為N-乙基-L-谷氨酰胺。



實驗室常用的檢測方法有,紫外分光光度法,高效液相色譜(HPLC)法,液相色譜質(zhì)譜聯(lián)用(LC-MS)法等。以HPLC為例,介紹一下檢測流程。


1.樣品前處理


將茶葉樣品研磨成碎末,準確稱量0.5g,加入100ml的純凈水,這可不是泡茶。在80℃的水浴上搖床,搖呀搖,浸提45min。拿出來,冷卻后就要進行離心,0.45um膜過濾,待測。



2.色譜條件


C18的色譜柱,250mm長,4.6mm內(nèi)徑,5um的粒徑;柱溫35-40℃。用乙腈和水梯度洗脫,也可以選擇其他有機溶劑配比,流速1ml/min。紫外檢測器,波長210nm或335nm,進樣量10-20uL。根據(jù)實際環(huán)境進行調(diào)整,確保比較好的出峰效果。



3.標準曲線


稱取少量茶氨酸(一般用L-茶氨酸)標準品,用純凈水或有機溶劑溶解并稀釋至0.01 mg/mL, 0.02 mg/mL, 0.5 mg/mL, 0.1 mg/mL, 0.15 mg/mL, 0.2 mg/mL。依次進樣到HPLC中,以上述的色譜條件,測出對應的色譜峰,峰面積進行積分。對應各個標準溶液,繪制出標準曲線,得到回歸方程。


4.樣品測定和計算


將樣品溶液進樣到HPLC中,和標準品相同的色譜條件,記錄出峰的情況。根據(jù)保留時間識別目標化合物的峰位置,對峰面積進行積分,代入到回歸方程,就可以計算出樣品中的茶氨酸含量。另外,有的還需要計算檢測限,相關系數(shù),線性范圍,回收率,重復性等。


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