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β谷甾醇是一種天然的植物甾醇，它廣泛的存在于水果、蔬菜、堅(jiān)果、種子、大豆油和棉籽油等中。它的化學(xué)式C30H52O，分子量414.707，易溶于氯仿、二硫化碳，微溶于乙醇、丙酮，不溶于水，被用于醫(yī)藥原料、食品、化妝品等工業(yè)領(lǐng)域。從科研方面來(lái)說(shuō)，它具有調(diào)節(jié)膽固醇水平，免疫調(diào)節(jié)，抗炎，抗氧化和細(xì)胞保護(hù)等作用。

檢測(cè)樣本中的β-谷甾醇含量，常用的方法是高效液相色譜（HPLC），氣相色譜（GC），也有用到氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）的。氣相色譜測(cè)的話，需先衍生化（如硅烷化）生成揮發(fā)性衍生物，通過(guò)氣相色譜柱分離，氫火焰離子化檢測(cè)器（FID）或質(zhì)譜檢測(cè)器（MS）定量。以HPLC為例，簡(jiǎn)單的介紹一下檢測(cè)流程。

1.樣品處理

植物樣品一般用正己烷或石油醚提取脂質(zhì)，用KOH乙醇溶液皂化水解脂肪酸，用正己烷萃取游離甾醇。濃縮萃取液，0.45um膜過(guò)濾，待測(cè)。

2.色譜條件

采用C18反相色譜柱，250mm長(zhǎng)，4.6mm內(nèi)徑，5um粒徑，柱溫30-40℃或設(shè)置35℃。以甲醇和水為流動(dòng)相（95:5），等度洗脫。紫外檢測(cè)器，波長(zhǎng)為205nm或210nm，進(jìn)樣量10uL。僅供參考。

3.標(biāo)準(zhǔn)曲線

用β谷甾醇的標(biāo)準(zhǔn)品用甲醇進(jìn)行溶解并定容到一定的濃度，稱(chēng)為β谷甾醇的標(biāo)準(zhǔn)母液。梯度稀釋5-7個(gè)濃度點(diǎn)，這個(gè)稀釋的倍數(shù)可以是2,5,10等，盡可能的覆蓋到樣本溶液的濃度范圍，這里需要考慮的是hplc的檢測(cè)限。將各個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)樣到HPLC中，對(duì)各個(gè)色譜峰的面積進(jìn)行積分，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到回歸方程。

4.樣品測(cè)定

根據(jù)保留時(shí)間，可以對(duì)樣品的色譜峰確定β谷甾醇的峰。對(duì)這個(gè)峰面積進(jìn)行積分，并代入到回歸方程，計(jì)算出樣品溶液中的β谷甾醇的含量。